The A1 ER Module provides high quality PSF models for Nikon’s high performance objective lenses, taking the guesswork out of deconvolution analysis.  Other features include automatic or manual mode for iteration selection, enhanced spherical aberration correction, and robust algorithms for noise estimation and removal.

With A1 ER your theoretical resolution is your practical resolution.

Growth cone maximum intensity projection acquired using the Nikon A1+ (left) and following A1 ER deconvolution processing (right).

Actin (red) and tubulin (green) in a HeLa cell imaged with the A1+ (left) and following A1-ER deconvolution processing (right).

O A1+ utiliza um escâner galvanométrico que possibilita a captura de imagens de alta resolução, de até 4096 x 4096 pixels. Além disso, com os sistemas recém desenvolvidos de acionamento de escâner e amostragem, e com a tecnologia de correção de imagem, também é possível a realização de aquisições a 10 fps (512 x 512 pixels).

Peixe zebra marcado com quatro sondas (Imagem capturada com escâner galvanométrico) Núcleo (azul): Hoechst33342, Filhote (verde): GFP, Nervo (amarelo): Alexa555, Músculo (vermelho): Alexa647.

Drosophila sp. coração embrionário.

Células endoteliais microvasculares do cérebro de um bovino marcadas com MitoTracker (mitocôndria, amarelo), faloidina (actina, azul) e Hoechst (DNA, magenta).

A comparação de sensibilidade entre um PMT GaAsP e um PMT normal, mostra que o PMT GaAsP possui uma sensibilidade maior do que o normal, oferecendo uma eficiência quântica elevada, de até 45%.

* A eficiência quântica indica logaritmo

A Nikon desenvolveu a unidade multidetectora GaAsP equipada com dois PMTs GaAsP e dois PMTs normais.

Um PMT GaAsP tem uma sensibilidade muito mais elevada do que um PMT normal, o que permite a aquisição de sinais mais brilhantes com o mínimo de ruído de fundo, mesmo com fluorescência fraca, que até então era difícil de ser detectada.

Utilizando o escâner ressonante, o PMT GaAsP consegue capturar imagens de baixo ruído em alta velocidade.

Detector GaAsP

Detector normal

O método de incidência de ângulo baixo, utilizado em espelhos dicróicos, aumenta a eficiência de fluorescência em 30%.

Método de ângulo de incidência convencional de 45°  As características de reflexão-transmissão dependem muito da polarização

Método de incidência de ângulo baixo  As características de reflexão-transmissão pouco dependem da polarização

Ao se empregar um orifício hexagonal, obtém-se um brilho mais elevado, equivalente ao brilho obtido com um orifício circular.

Orifício quadrado 64% da área do círculo

30% mais de luz

Orifício hexagonal 83% da área do círculo

A tecnologia original da Nikon de processamento e integração dupla de sinais (DISP) foi implantada nos circuitos de processamento de imagem para aumentar a eficiência elétrica, resultando em uma relação sinal-ruído extremamente elevada.

É possível a aquisição de uma imagem espectral de 32 canais (512 x 512 pixels) com um único escaneamento em 0,6 segundos. Além disso, podem ser capturadas imagens de 512 x 32 pixels a 24 fps.

Discriminação precisa em alta velocidade

A discriminação espectral precisa oferece o desempenho máximo na separação de espectros de fluorescência sobrepostos de perto e na eliminação da autofluorescência. Algoritmos superiores e processamento de dados de alta velocidade permitem a discriminação em tempo real durante a aquisição de imagens.

Imagens espectrais discriminadas de célula HeLa marcadas com fluorescência em cinco cores. Espécimes, cortesia do: Dr Tadashi Karashima, Department of Dermatology, Kurume University School of Medicine.

Ajustes de intensidade sem filtro são possíveis, escolhendo-se as faixas espectrais desejadas entre 32 canais que correspondem ao espectro da sonda fluorescente em uso e combinando-as para criar a função filtro.

O software de controle NIS-Elements C permite o controle integrado do sistema de imagens confocais, do microscópio e dos dispositivos periféricos, através de uma interface  simples e intuitiva. Também estão disponíveis várias funções de análise confiáveis.